Mikroorganizmų kolekcija - Gamtos tyrimų centras

Gamtos tyrimų centro Biodestruktorių tyrimo laboratorijoje yra sukaupta unikali įvairių sistematinių grupių gyvų mikroorganizmų kolekcija, kuri yra mikrobiologijos mokslo, praktikos ir vystymosi pagrindas, mikroorganizmų padermių ir informacijos apie juos šaltinis. Šioje kolekcijoje atspindima mikroorganizmų biologinė įvairovė, nes joje palaikomos saprotrofinių, mikosimbiotrofinių, parazitinių, biotechnologijose naudojamų mikroskopinių grybų, mielių ir bakterijų padermės. Kasmet kolekcija papildoma naujomis rūšimis ir padermėmis, gebančiomis funkcionuoti ant įvairių substratų, pasižyminčiomis specifinėmis taikomąją reikšmę turinčiomis savybėmis ir produkuojančiomis biologiškai aktyvias medžiagas (fermentus, baltymus, vitaminus, organines rūgštis, pigmentus ir kt.). Kolekcijoje palaikomos LR patentuotos mikroorganizmų padermės: Trichoderma harzianum VNB-16, skaidanti mazutą (patento Nr. LT 4794B); Candida lipolytica C.6.1-5, oksiduojanti naftą ir jos produktus (patento Nr. LT4793B); Pseudomonas fluorescens IGN 57, skaidanti naftą ir naftos produktus (patento Nr. LT4792B); mikroorganizmų Candida lipolytica ir Trichoderma harzianum padermės, kurios skirtos pramoninei gamybos atliekai – monoetanolaminui (MEA) – biodegraduoti (patentas Nr. 5502B). Nemaža kolekcijos dalis yra iš mediciniškai svarbių mikroorganizmų kategorijos ir priklauso Trichophyton, Microsporum, Candida, Geotrichum, Aspergillus ir kt. gentims. Sukaupta didžiulė aplinkoje funkcionuojančių mikroorganizmų kolekcija įgalina pažinti ir išlaikyti vertingų mikroorganizmų genofondą, užtikrinti jų gyvybinę ir taikomąją reikšmę lemiančius savitumus. Kolekcijoje vykdomas periodiškas saugojamų kultūrų patikrinimas, kuriami nauji, efektyvūs saugojimo ir aktyvumo palaikymo bei panaudojimo metodai. Ilgalaikiam mikroorganizmų palaikymui naudojami kriogeniniai ir liofilizacijos metodai. Šiuo metu kuriama elektroninė duomenų bazė apie GTC BTL kolekcijoje palaikomus gyvus mikroorganizmus. Elektroninė duomenų bazė patenkins mokslo ir studijų, gamybinių, aplinkos apsaugos, kontrolės, švietimo įstaigų ir plačios visuomenės reikmes apie sukauptą mikroorganizmų genofondą, nes Lietuva viena iš nedaugelio Europos Sąjungos šalių, kuri neturi nacionalinės mikroorganizmų kolekcijos.

Mikroorganizmų saugojimo sąlygos

Sutrumpinimas	Saugojimo būdas
T-1	Alaus misos agarizuota terpė. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-2	Saburo agaras. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-3	Porėti stiklo rutuliukai (Microbank^TM, PRO-LAB DIAGNOSTICS, Kanada). Saugoma -70 ºC temperatūroje.
T-4	Alaus misos agarizuota terpė su 1 % medienos pjuvenų. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-5	Čapeko terpė. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-6	Bulvių dekstrozės agaras. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-7	Mitybinis agaras. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-8	Mitybinis agaras. Giluminis pasėlis, užpilta vazelinu. Saugoma +4 ºC temperatūroje.
T-9	Terpė azotą fiksuojančioms bakterijoms palaikyti. Paviršinis pasėlis ant nuožulnaus agaro. Saugoma +4 ºC temperatūroje.

Mikroorganizmams saugoti naudojamos mitybinės terpės

Pavadinimas	Sudėtis ir paruošimas
Salyklo agaras	Mikroorganizmams auginti salyklo koncentratas skiedžiamas vandentiekio vandeniu iki 7–8° pagal Balingą ir pridedama 2–2,5 % agaro. Terpė sterilizuojama autoklave esant 112 °C temperatūrai 25–30 min.
Saburo agaras	Gliukozė – 20 g, peptonas – 10 g agaras – 20 g, dist. vanduo – 1000 ml. Terpė sterilizuojama autoklave esant 121 °C temperatūrai 15 min.
Salyklo agaras su 1 % medienos pjuvenų	Mikroorganizmams auginti salyklo koncentratas skiedžiamas vandentiekio vandeniu iki 7–8° pagal Balingą ir pridedama 1 % smulkių pušies pjuvenų bei 2–2,5 % agaro. Terpė sterilizuojama autoklave esant 112 °C temperatūrai 25–30 min.
Čapeko terpė	Sacharozė – 30 g, natrio nitratas – 3 g, dikalio hidrofosfatas – 1 g, kalio chloridas – 0,5 g/ml, magnio sulfato heptahidratas – 0,5 g/ml, geležies sulfatas – pėdsakai, dist. vanduo – 1000 ml, agaras – 20 g. Terpė sterilizuojama autoklave esant 121 °C temperatūrai 15 min.
Bulvių dekstrozės agaras	Bulvių užpilas – 200 g, gliukozė – 20 g, agaras – 17 g/l. Terpė sterilizuojama autoklave esant 121 °C temperatūrai 15 min.
Mitybinis agaras	Jautienos ekstraktas – 1 g, mielių ekstraktas 2 g, peptonas – 5 g, natrio chloridas – 5 g, dist. vanduo – 1000 ml, agaras – 15 g. Terpė sterilizuojama autoklave esant 121 °C temperatūrai 15 min.
Azotą fiksuojančių bakterijų terpė	Sacharozė – 20 g, dikalio hidrofosfatas – 0,64 g, kalio dihidrofosfatas – 0,16 g, magnio sulfato heptahidratas – 0,2 g, natrio chloridas – 0,2 g, kalcio sulfato tetrahidratas – 0,05 g, natrio molibdato tetrahidratas (0,05 %) – 5 ml, geležies sulfato tetrahidratas – (0,05 %) – 5 ml, dist. vanduo – 1000 ml, agaras – 15 g. Terpė sterilizuojama autoklave esant 121 °C temperatūrai 15 min.